一、等电聚焦步骤
1. 从冰箱中取出-20冷冻保存的水化上样缓冲液，置室温溶解。
2. 型冰箱中取出-20冷冻保存的TPG预制胶条，室温放置10min。
3. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘从左而右线性加入样品。在槽 两端各1cm左右不要加样，中间的样品液一定要连贯。
注意：不要产生气泡。否则影响到胶条中蛋白质的分布。
4. 当所有的蛋白质样品都已经加入到聚焦盘或水化盘中后，用镊 子轻轻地去除预制胶条上的保护层。
5. 分清胶条的正负极，轻轻地将IPG胶条胶面朝下置于聚焦盘或 水化盘中溶液上，是的胶条的正极（标有+）对应于聚焦盘的正极。 确保胶条与电极紧密接触。不要使样品溶液弄到胶条背面的塑料支 撑膜上，因为这些溶液不会被胶条吸收。同样还要注意不使胶条下 面的溶液产生气泡。如果已经产生气泡，用镊子轻轻地提起胶条的 一端，上下移动胶条，直到气泡被赶到胶条以外。
6. 在每根胶条上覆盖2-3ml矿物油，沿着胶条，使矿物油一滴一滴 慢慢加在塑料支撑膜上。
7. 对好正负极，盖上盖子。
8. 设置等点聚焦程序。
二、等点聚焦结束后样品的处理
1. 聚焦结束的胶条。立即平衡，进行第二向SDS-PAGE电泳，否则将胶条置于-20冰箱保存。